Laboratorio di biologia/Ematossilina eosina

La colorazione con ematossilina eosina è la colorazione di base per lo studio della istologia animale.

Materiale

• vetrino con una sezione non colorata
• vetrino coprioggetto
• un supporto per vetrini con manico lungo almeno 5-10 cm
• 10 vaschette di vetro la cui dimensione sia compatibile con quella del portavetrini
  • 7 di queste andranno a formare la scala di idratazione/deidratazione
  • una serve per l'ematossilina
  • una per l'eosina
  • una per i lavaggi
• xilene, 2 vaschette
• etanolo assoluto, 2 vaschette
• etanolo 90°, 2 vaschette
• Emallume di Mayer (Ematossilina)
• Soluzione alcoolica di eosina
• acqua distillata 1 litro

Protocollo

Idratazione

Mettere il vetrino in stufa 60 °C fino a quando la paraffina non è diventata liquida.

Dopodiché si immerge:

1. 5 minuti in xilene 1
2. 5 minuti in xilene 2
3. 5 minuti in xilene 3
4. 5 minuti in etanolo assoluto 1
5. 5 minuti in etanolo assoluto 2
6. 5 minuti in etanolo assoluto 3
7. 5 minuti in etanolo 95° 1
8. 5 minuti in etanolo 95° 2
9. 2 minuti sotto acqua corrente
10. 2 minuti in acqua distillata facendo 2 cambi

Ematossilina

1. immergere i vetrini un minuto nel colorante
2. lavare sotto acqua corrente per 2 minuti, senza dirigere il getto direttamente sulle sezioni

Eosina

1. immergere i vetrini nell'eosina per 1 minuto
2. lavare per pochi secondi in acqua corrente ferma

Disidratazione

1. 2 minuti in etanolo 95° 1
2. 2 minuti in etanolo 100° 1
3. 3 minuti in etanolo 100° 2
4. 3 minuti in etanolo 100° 3
5. 5 minuti in xilene 1
6. 5 minuti in xilene 2
7. 5 minuti in xilene 3
8. montare con montante il vetrino coprioggetto utilizzando del montante sintetico bagnato con una goccia di xilene
9. lasciare asciugare per 15 minuti