Laboratorio di biologia/Ematossilina eosina
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La colorazione con ematossilina eosina è la colorazione di base per lo studio della istologia animale.
Materiale
modifica- vetrino con una sezione non colorata
- vetrino coprioggetto
- un supporto per vetrini con manico lungo almeno 5-10 cm
- 10 vaschette di vetro la cui dimensione sia compatibile con quella del portavetrini
- 7 di queste andranno a formare la scala di idratazione/deidratazione
- una serve per l'ematossilina
- una per l'eosina
- una per i lavaggi
- xilene, 2 vaschette
- etanolo assoluto, 2 vaschette
- etanolo 90°, 2 vaschette
- Emallume di Mayer (Ematossilina)
- Soluzione alcoolica di eosina
- acqua distillata 1 litro
Protocollo
modificaIdratazione
modificaMettere il vetrino in stufa 60 °C fino a quando la paraffina non è diventata liquida.
Dopodiché si immerge:
- 5 minuti in xilene 1
- 5 minuti in xilene 2
- 5 minuti in xilene 3
- 5 minuti in etanolo assoluto 1
- 5 minuti in etanolo assoluto 2
- 5 minuti in etanolo assoluto 3
- 5 minuti in etanolo 95° 1
- 5 minuti in etanolo 95° 2
- 2 minuti sotto acqua corrente
- 2 minuti in acqua distillata facendo 2 cambi
Ematossilina
modifica- immergere i vetrini un minuto nel colorante
- lavare sotto acqua corrente per 2 minuti, senza dirigere il getto direttamente sulle sezioni
Eosina
modifica- immergere i vetrini nell'eosina per 1 minuto
- lavare per pochi secondi in acqua corrente ferma
Disidratazione
modifica- 2 minuti in etanolo 95° 1
- 2 minuti in etanolo 100° 1
- 3 minuti in etanolo 100° 2
- 3 minuti in etanolo 100° 3
- 5 minuti in xilene 1
- 5 minuti in xilene 2
- 5 minuti in xilene 3
- montare con montante il vetrino coprioggetto utilizzando del montante sintetico bagnato con una goccia di xilene
- lasciare asciugare per 15 minuti