Laboratorio di biologia/SDS-PAGE: differenze tra le versioni
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Questa tecnica è utile nella separazione delle proteine in base al peso. Le proteine grazie al [[w:Sodio dodecilsolfato|Sodio dodecilsolfato]] vengono denaturate, linearizzate e caricate negativamente in modo che posano procederere verso il catodo attraverso la matrice di [[w:poliacrilamide|poliacrilamide]]
==Soluzioni di lavoro==
===Gel di poliacrilamide===
*Soluzione Acrilamide/bis acrilamide (solitamente 29:1) al 30% p/v
*Soluzione '''B'''
**
**
**aggiustare il pH e portare a 0,5 L
*Soluzione stacking buffer (SB) Tris 1 M pH 6.8
** 3.7 g Tris-base
** 3.07 g Tris-HCl
**Aggiustare il ph e portare a 50 ml
*Soluzione SDS 10% p/v
**50 g di [[w:Sodio dodecil solfato|Sodio dodecil solfato]] in 500 di acqua
**:La polvere si dissolve molto lentamente, preparare la soluzione almeno il giorno prima
*APS 10% p/v
**1 g di [[w:persolfato di ammonio|persolfato di ammonio]] in 10 ml di acqua
**:l' ammonio persolfato si decompone rapidamente, la soluzione indicata si mantiene a +4°C per una sett in un contenitore schermato con foglio di alluminio. Altrimenti preparare 50ml e fare delle aliquote di volume utile (olitamente 0,5 ml) da conservare al -20°C.
*[[w:Temed|Temed]]
==Tampone di diluizione del campione (Sample buffer)===
==Tmpone di corsa===
[[Laboratorio/SDS-PAGE/Tabella|tabella]]
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