Il '''western blot''' o '''immunofissazioneimmunorivelazione''' è una tecnica [[w:immunochimica|immunochimica]] che permette di identificare la presenza di una determinata [[w:proteina|proteina]] in una miscela di proteine separate [[Laboratorio/SDS-PAGE|elettroforeticamente]], mediante il riconoscimento da parte di [[w:anticorpo|anticorpi]] specifici. Esistono poi variazioni quali il ''dot blot'' o ''slot blot'', in cui la miscela proteica non viene separata in base alle dimensioni ma ci si affida alla selettivitá antigene/anticorpo per rilevare esclusivamentteesclusivamente la presenza o meno dell'antigene. Successivamente le proteine vengono trasferite su un supporto, che comunemente è una membrana di [[w:nitrocellulosa|nitrocellulosa]], e quindi si procede alla reazione immunomediate ed alla rivelazione enzimatica didel questacomplesso antigene/anticorpo.
Recentemente sono state messe a punto tecniche che permettono il riconoscimento antigene/anticorpo direttamente nella matrice del gel, quindi evitando il trasferimento su membrana, ma sono limitate alloall'analisi screeningdi un numero ristretto di pocheproteine molecolead moltoespressione espresseelevata.
Quì di seguito indichiamo un protocollo di base, ottimo per un gran numero di proteine con le diluizioni e i tempi generalmente usati. Nella seconda parte della pagina verrà infatti spiegato come progettare un esperimento per la taratura di queste variabili.
