Laboratorio di biologia/Saggio di Bradford: differenze tra le versioni
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È il metodo più comune e rapido per la msurazione spettrofotometrica della concentrazione di proteine in un campione. È una metodica che risente di numerose interferenze quali la presenza di detergenti ionici e non ionici, tutttavia presenta dei vantaggi rispetto alla lettura a 280, minore interferenza dei contaminanti non proteici, e rispetto al [[Laboratorio/Bca_assay|metodo BCA]], insensibilità a reagenti riducenti od ossidanti o ioni metallici. Queste caratteristiche lo rendono il metodo di elezione per la misurazione di eluati cromatografici con presenza o meno di glutatione ridotto.
==Procedimento==
#Preparare aliquote da 1 ml di BSA 1mg/ml in tampone analogo a quello dove si trovano le proteine da misurare.▼
#Metteree in ogni pozzatto 40 uL di reagente di Bradford▼
▲#Preparare aliquote da 1 ml di BSA
#Mettere in una piastra da 96 pozzetti 20, 18, 15, 10, 7, 5, 3, 2 microlitri di soluzione standard in due pozzatti rispettivamente e lasciare altri due vuoti.▼
▲#Mettere
#Fare lo stesso con la fila sottostante
#In altri e due pozzetti mettere 20uL di campione, ripetere per ogni campione.
#Portare a 200 uL con acqua
#Leggere con lo spettrofotometro a 595nm
{{Avanzamento|50%}}
[[Categoria:Laboratorio|Saggio di Bradford]]
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