Laboratorio di biologia/ELISA: differenze tra le versioni

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Questa è una tecnica molto versatile in cui grazie agli anticorpi e ad una oculata scelta di controlli positivi e negativi è possibile ricavare un numero notevole di informazioni anche in maniera semiquantitativa. Ci sono molti tipi di elisa chiamati con diversi nomi che indicano differenze nel costrutto utilizzato. Iniziamo qui a vedere i principii generali del processo per poi chiarire le varianti.
 
Il nucleo della tecnica è il ''costrutto anticorpo antigene'' ovvero l'unione di un'antigene con un anticorpo e con un secondo anticorpo coniugato con un sistema rivelatore analizzato in seguito. La seconda nozione di base è la capacità del PVCPolipropilene di formare legami con le proteine.
 
Alla specificità del legame antigene anticorpo si unisce la sensibilità dello sviluppo tramite reazione enzimatica.
Atttualmente in commercio esistono innumerevoli kit già pronti per svariate applicazioni nel campo della diagnostica molecolare in cui l'unica cosa che manca è il campione da analizzare. Questi kit fondamentali in diagnostica per la velocità e la riproducibilità della misura risultano poco pratici nel campo della ricerca per la poca flessibilità. Per usare questi kit conviene leggere il libretto di istruzioni.
 
AtttualmenteAttualmente in commercio esistono innumerevoli kit già pronti per svariate applicazioni nel campo della diagnostica molecolare in cui l'unica cosa che manca è il campione da analizzare. Questi kit fondamentali in diagnostica per la velocità e la riproducibilità della misura risultano poco pratici nel campo della ricerca per la poca flessibilità. Per usare questi kit conviene leggere il libretto di istruzioni.
 
Di seguito sarà descritta la tecnica per ottenere un sistema completo.
 
==materialeMateriale==
 
*Piastre di PVCPolipropilene tipoo Corningtrattate specificamente per ELISA da 96 o 124 pozzetti a fondo curvo o piatto (migliore per le letture spettrofotometriche)
*[[Laboratorio/Appendice 1|Tamponi:]]
** tampone fosfato 0,1 M pH 9 oppure (Tampone citrato-carbonato pH 8,5-9)
**PBS pH 7.2 o 7,4
*Proteina 1, ovvero l'Antigene o l'Anticorpo purificato
*Campione da analizzare
*anticorpo ponteprimario
*anticorpo secondario coniugato con Alp o HRP
 
[[Categoria:Laboratorio|ELISA]]