Laboratorio di biologia/Conta cellulare spettrofotometrica: differenze tra le versioni

 

Spesso si rivela necessario in alcuni esperimenti determinare in maniera quantitativa la quantità di cellule aderenti ad una piastra di coltura prima e dopo un esperimento. Sono stati proposti molti metodi colorimerici, uno di rapida esecuzione, effettuabile con materiali di facile reperimento, è il test con il [[w:Violetto di genziana|cristal violetto]] un colorante idrosolubile con affinità per il [[w:DNA|DNA]] a ph neutro, solubile a ph acido.

Il metodo fornisce una valutazione relativa, data dal rapporto (assorbanza supporto test) / (assorbanza controllo negativo). Quindi bisogna mantenere come sempre un controllo negativo che può essere una piastra lavata o incubata con pbs (con o senza ioni bivalenti) nel caso si debba valutare il distacco cellulare; una piastra non trattata o trattata con BSA (Bovine serum albumin) come controllo negativo in un esperimento di adesione cellulare.

 

 

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